PicoGreen熒光染料可對DNA樣品進行定量
更新時間:2019-09-10 點擊次數(shù):3034
PicoGreen熒光染料法是一種靈敏的雙鏈DNA檢測方式,通過Modulus檢測儀可以檢測到pg級的微量DNA。這種方法主要用來測定微量的DNA殘留,或對DNA樣品進行定量。
作為DNA染色劑之一的PicoGreen熒光染料特異性地與樣品中雙鏈DNA結合,產生熒光信號。PicoGreen技術可以檢測到低達0.5納克雙鏈DNA的變化。DNA的微量增加引起熒光信號強度或相對熒光單位(RFU)的顯著增加。其自發(fā)熒光忽略不計,重復性標準差異低,不受樣品化學成分的干擾。
Picogreen是一種極為靈敏的熒光核酸染料,常用于雙鏈DNA的定量檢測。歷來DNA濃度的測定在cDNA文庫的構建,DNA亞克隆、PCR產物的估測等領域中具有重要意義。疫苗等生物制品中殘留微量DNA的檢測更是直接關系到人類的健康。
Picogreen僅在與DNA雙鏈結合后才發(fā)出熒光,且所產生的熒光與DNA濃度呈正比,在存在ssDNA、RNA和單體核苷酸的條件下,可以選擇性地檢測低至25pg/ml的dsDNA。該分析在三個數(shù)量級范圍內呈線性,且?guī)缀鯚o序列依賴性,可以地測量多個來源的DNA,包括基因組DNA、病毒DNA、小量提取DNA或PCR擴增產物。可用熒光分光光度計或熒光酶標儀讀數(shù),Ex/Em=480nm/520nm。