產品分類
Product Category詳細介紹
品牌 | 其他品牌 | CAS | / |
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分子式 | / | 純度 | / |
分子量 | / | 貨號 | AC19L011/AC19L012 |
規格 | 25mg/100mg | 供貨周期 | 現貨 |
應用領域 | 生物產業 |
產品描述
D-熒光素鉀鹽(超純)是熒光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整個生物技術領域,特別是體內活體成像技術。其作用機制是在ATP和熒光素酶的作用下,熒光素(底物)能夠被氧化發光。當熒光素過量時,產生的光量子數與熒光素酶的濃度呈正相關性(見下圖)。將攜帶熒光素酶編碼基因(Luc)的質粒轉染入細胞后,導入研究動物如大小鼠體內,之后注入熒光素,通過生物發光成像技術(BLI)來檢測光強度變化,從而實時監測疾病發展狀態或藥物的治療功效等。也可以利用ATP對此反應體系的影響,根據生物發光強度的變化來指示能量或生命體征。
D-熒光素也常用于體外研究,包括熒光素酶和ATP水平分析;報告基因分析;高通量測序和各種污染檢測。目前市場上有三種產品形式,D-熒光素(游離酸),D-熒光*鈉鹽,以及D-熒光*鉀鹽。這三種產品主要的差別在于溶解特性上。D-熒光素(游離酸)水溶性以及緩沖體系的溶解性都很弱,除非溶于弱堿如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇(10 mg/ml)和DMSO(50 mg/ml)。但鈉鹽和鉀鹽形式的D-熒光素能夠非常容易且快速的溶入水或者緩沖液中,使用方便,溶劑無毒性,特別適合體內實驗。配成液體后的這三種產品,在絕大多數的應用上都沒有實質性的差別。
D-Luciferin, Potassium Salt D-熒光*鉀鹽(超純) 可替代Goldbio/LUCK-1G/CAS:115144-35-9/PE122799/ Biovision K250-100等產品,優勢及用法詳見本文或咨詢銷售人員。
訂購信息
產品名稱 | 貨號 | 規格 |
D-熒光素鉀鹽(超純)(D-Luciferin, Potassium Salt) | AC19L011 | 25mg |
D-熒光素鉀鹽(超純)(D-Luciferin, Potassium Salt) | AC19L012 | 100mg |
D-熒光素鉀鹽(超純)(D-Luciferin, Potassium Salt) | AC19L014 | 500mg |
D-熒光素鉀鹽(超純)(D-Luciferin, Potassium Salt) | AC19L013 | 1g |
產品性質
中文別名(Chinese synonym) | D- 熒光*鉀鹽 |
英文別名(English synonym) | (S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid potassium salt; D-Luciferin firefly, potassium salt; |
CAS號(CAS NO.) | 115144-35-9 |
分子式(Formula) | C11H7N2O3S2 K |
分子量(Molecular weight) | 318.42 g/mol |
外觀(Appearance) | 淡黃色粉末 |
溶解性(Solubility) | 溶于水(60 mg/ml) |
純度(Purity)(HPLC) | >99% |
保存方法
藍冰運輸,-20℃保存。有效期24個月。
使用方法
1.體外生物發光檢測
(1)用蒸餾水溶解D-熒光*鉀鹽,配制成100 mM的儲存液(200×,濃度30 mg/mL)。混勻后立即使用或分裝于-20℃或-80℃凍存,避免反復凍融。
(2)用預熱好的組織培養基1:200稀釋儲存液,配制工作液(終濃度150 µg/mL)。
(3)去除培養細胞的培養基直至無殘留。
(4)待圖像分析前,向細胞內添加1×熒光素工作液,然后進行圖像分析(或者細胞放在37℃短時間孵育后檢測可增強信號)。
2. 活體成像分析
(1)用無菌的DPBS(w/o Mg2+)配制D-熒光*鉀鹽工作液(15 mg/mL),0.2 μm 濾膜過濾除菌。混勻后立即使用或分裝于-20℃或-80℃凍存,避免反復凍融。一旦使用,放到4℃解凍,保持冰冷且避光。
(2)注射量取決于注射方式,具體如下:
注射方式 | 劑量 |
靜脈注射(25~27gauge針頭) | 按10 μL/g體重濃度,加入相應體積的15mg/mL熒光素工作液 |
腹腔注射(25~27gauge針頭) | 按10 μL/g體重濃度,加入相應體積的15mg/mL熒光素工作液 |
肌肉注射(27gauge針頭) | 50 μL,濃度為1~2mg/mL熒光素工作液 |
鼻內注射(pipette) | 50 μL,濃度為3mg/mL熒光素工作液 |
(3)注射入體內10~20 min(待光信號達到峰值的穩定平臺期),再進行成像分析。
【注】:建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學曲線,從而確定峰值的信號檢測時間和信號平臺期。
注意事項
1.本品(firefly luciferin)和甲蟲熒光素(beetle luciferin)都是指化合物(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl) -2-thiazoline-4-carboxylic acid,僅僅是不同公司在命名上的差異。
2.本品保存和操作的過程中都要避光。另外水溶性儲存液過濾除菌后,可以-20℃或-80℃分裝凍存,避免反復凍融。如果有條件,對儲存液充氮氣或氬氣(防止氧化),穩定性和保存時間更長,長達1年。
3.注射方式,動物類型以及體重等都會影響信號的發射,因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學曲線,確實合適信號平臺期和合適的檢測時間。
4.熒光*鉀鹽和熒光*鈉鹽應用上沒有差別,兩者的差別在于物理性狀上如外形和溶解性。鈉鹽的水溶性高于鉀鹽。從目前發表的文獻來看,鉀鹽的使用率遠高于鈉鹽,尤其是體內實驗,兩者功效相同。
5.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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